一、 質譜分析的原理和特點

　　質譜分析法是在高真空系統中測定樣品的分子離子及碎片離子質量，來確定樣品相對分子質量及分子結構的方法。化合物分子受到電子流沖擊后，形成的帶正電荷分子離子或碎片離子，按照其質量m和電荷z的比值m/z(質荷比)大小依次排列而被記錄下來，這種方法稱為質譜。

　　一般將樣品于高真空中，通常真空度達到10-6Torr，經過離子源受到高速電子流或強電場等作用，失去外層電子而生成分子離子，或化學鍵斷裂生成各種碎片離子，然后將分子離子和碎片離子引入到一個強的正電場中。不同質荷比(m/z)的離子具有不同的速度，利用離子不同質荷比及其速度差異，質量分析器可以將其分離，然后由檢測器檢測其信號強度，最后得到一張以質荷比為橫坐標，以相對強度為縱坐標的質譜圖。

　　質譜分析的特點：

　　靈敏度高，樣品用量少應用范圍廣;分析速度快，并可實現多組分同時測定;與其它儀器相比，儀器結構復雜，價格昂貴，使用及維修比較困難。

　　儀器流程：

　　通過合適的進樣裝置將樣品引入并進行氣化;氣化后的樣品引入到離子源進行電離—離子化過程;電離后的離子經過適當的加速后進入質量分析器，按不同的質荷比(m/z)進行分離;經檢測器檢測、記錄后獲得質譜圖。

　　二、質譜常見問題分析

　　1. 質譜不出峰的可能原因?

　　1)進樣系統與離子源沒連接或有漏液、2)六通閥漏液、3)霧化氣沒開、4)噴霧電壓沒有、5)離子進入分析器的離子通道堵塞、6)噴霧毛細管堵塞

　　2. 等度還是梯度洗脫如何選擇?

　　一般來說對于組成簡單的樣品可以采用等度洗脫，而對于那些復雜的樣品分離通常需要進行梯度洗脫。

　　3. 氣質和液質有何不同?

　　真空系統和電離方式會有所不同。氣質的真空系統，需要一個小的機械泵和一個分子渦輪泵。液質的機械泵要比氣質大，需要兩個分子渦輪泵。氣質的電離方式有電子電離(EI)和化學電離(CI)。液質的電離方式有電噴霧電離(ESI)、大氣壓化學電離(APCI)和大氣壓光電離(APPI)。

　　3. APCI和ESI的不同點?

　　1)離子產生的方式不同。APCI利用電暈放電離子化，氣相離子化。ESI利用離子蒸發，液相離子化。

　　2)能被分析的化合物類型不同。APCI適合弱極性，小分子化合物，且具有一定的揮發性;ESI 極性化合物和生物大分子。

　　3)APCI不能生成一系列多電荷離子，所以不適合分析大分子;ESI 能生成一系列多電荷離子，特別適用于蛋白，多肽類等生物分子。

　　4. 質譜是如何定量的?

　　質譜定量是以后面產生的碎片峰(子離子)定量。但是這一子離子是由母離子在碰撞室產生的特征性碎片，所以用MRM定量靈敏度會比用SIM定量好很多。建立方法的步驟是：用一定溶度的標準品溶液(1-10 ug/mL)調諧化合物的一級質譜條件，找到母離子的最佳質譜條件。然后對母離子進行打碎，優化碰撞能量，得到其特征性的子離子。最后利用該質譜條件和該母離子、子離子對進行定量。

　　5. 如何更換機械泵油?

　　一般6個月到一年更換一次泵油，可同時停機對儀器進行一次清洗。更換泵油的時候，先開啟振氣閥5-10分鐘，待將泵內沉淀振起后，關閉振氣閥，同時關閉電源。打開泵下的泵油排放閥門，放掉舊油。如果泵油已經很臟，則可取少許新油清洗泵后放掉再注入新油。

　　6. 質譜基線高是什么原因?

　　質譜的基線其實跟液相的紫外檢測器和熒光檢測器一樣，基線高的原因不外乎內部和外部的原因。

　　1)選擇的流動相在質譜的響應比較高，比如水相比較多的時候，噪音比較大些;還有如果鹽含量比較大的時候，噪音更大些。

　　2)檢測器的靈敏度越高的時候，噪音應該越高。如果質譜的污染比較嚴重時，基線肯定比較高。比如離子阱或檢測器受到污染，一方面降低了質譜的靈敏度，另一方面增加了基線噪音。

　　3)質譜的基線很多時候還跟你選擇的離子寬度有關。比如作選擇離子掃描的時候，基線就低些。

　　4)多級質譜一般做二級或三級質譜，基線噪音就低很多。