分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀的區(qū)別？

分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀都是實(shí)驗(yàn)室常用的分析測(cè)量工具，它們的測(cè)定原理相同，都是利用朗伯-比耳定律，測(cè)定樣本的吸光度。

分光光度計(jì)，又稱光譜儀，是將成分復(fù)雜的光分解為光譜線的科學(xué)儀器。測(cè)量范圍一般包括波長(zhǎng)范圍為380-780 nm的可見光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200-380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜，因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。

酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀。是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的儀器又稱微孔板檢測(cè)器。可簡(jiǎn)單地分為半自動(dòng)和全自動(dòng)2大類，其工作原理基本一致，其核心都是一個(gè)比色計(jì)，即用比色法來(lái)進(jìn)行分析。 一般測(cè)試液的終體積在250μL以下，可以用酶標(biāo)儀。

雖然分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀都是測(cè)定吸光度的儀器，但是他們還存在四大區(qū)別，了解這四大區(qū)別，可以指導(dǎo)我們更容易的完成檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。

1、比色容器

分光光度計(jì)用的是比色皿，通常是塑料（聚苯乙烯或異丁烯酸酯）、玻璃和石英材質(zhì)，每個(gè)比色皿一次只能盛裝一種溶液。

酶標(biāo)儀用的是酶標(biāo)板（塑料微孔板）。常用透明的聚苯乙烯材料制成，聚苯乙烯可以作為固相載體，對(duì)抗原、抗體或抗原抗體復(fù)合物的有較強(qiáng)的吸附作用。酶標(biāo)板通常為48孔或96孔，每個(gè)微孔可以盛裝不同的溶液。

2、光路方向

分光光度計(jì)是水平光路，而酶標(biāo)儀是垂直光路。由于酶標(biāo)板是多排多孔的，光線只能垂直穿過(guò)，因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過(guò)待測(cè)溶液和酶標(biāo)板的，光束既可是從上到下，也可以是從下到上。垂直光的優(yōu)點(diǎn)是標(biāo)本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小，缺點(diǎn)是受被測(cè)樣本液面是否水平、酶標(biāo)板透光性、孔底是否平整等影響較大。

3、光路長(zhǎng)度

光密度（OD值）與吸光系數(shù)、待測(cè)組分的濃度以及光路長(zhǎng)度成正比。所以光路長(zhǎng)度能直接影響OD值。

分光光度計(jì)采用的比色皿的寬度通常是1cm，所以光路長(zhǎng)度固定為1cm。只要在比色皿中加入足夠的待測(cè)溶液，其OD值不變。比如，待測(cè)溶液有5mL，無(wú)論在比色皿中加入2.5mL還是3mL，測(cè)出的OD一樣。

酶標(biāo)儀采用的是垂直光路, 光路的長(zhǎng)度是液體液面的高度，所以測(cè)得的OD值受到樣品的體積的影響。比如，待測(cè)溶液有1mL，在酶標(biāo)板上加入150uL和200uL，測(cè)出的OD值不同。因此，在酶標(biāo)板上加樣一定要操作規(guī)范，加樣偏差對(duì)結(jié)果影響比較大。

4、通道數(shù)

儀器的通道數(shù)直接影響實(shí)驗(yàn)效率。分光光度計(jì)通常是單通道，一次只能測(cè)定一個(gè)樣本，大量樣本的測(cè)定需要時(shí)間很長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)效率比較低。酶標(biāo)儀通常是8通道或12通道，一次可以同時(shí)測(cè)定8個(gè)或12個(gè)樣本，大量樣本的測(cè)定需要時(shí)間短，實(shí)驗(yàn)效率比較高。